293细胞怎样传代

293细胞怎样传代

293细胞不容易贴壁，所以很多人传代时都会遇到还没消化，细胞就脱落的问题。虽然细胞容易脱落，但彼此间接触很紧密，不容易吹散，所以293细胞的消化是最重要的。

待293细胞长到80%-90%即可传代。（以T25细胞瓶为例）

从培养箱中拿出细胞，细胞瓶不要垂直拿，尽量水平，移动速度慢。转移到细胞台中。

酒精棉球消毒后，拧下盖子，用吸管吸走培养基，切记不要直接倒，这样细胞会立马出现脱落现象。

加PBS，用吸管吸5ml PBS小心的加到细胞瓶中，然后让细胞瓶平放，再用吸管吸走PBS。

加胰酶消化，胰酶选择0.05%，不加EDTA。胰酶用量至少3ml，切记加入胰酶后不要晃动细胞瓶，让细胞瓶慢慢平放，胰酶覆盖全部细胞。

心中数20-30秒，立即轻轻吸走胰酶。将细胞瓶放到培养箱中干消化。

消化5-7分钟后，能看到细胞呈单个排列，即消化成功。加入培养基吹散细胞分瓶培养。